英文名稱(chēng) ： Creatine Kinase(CK) Activity Assay Kit
產(chǎn)品包裝 ： 盒裝
產(chǎn)品規(guī)格 ： 50T/48S
儲(chǔ)存條件 ： -20℃
檢測(cè)方法 ： 紫外分光光度法
有 效 期 ： 6個(gè)月
產(chǎn)品組成：
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試劑名稱(chēng)
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規(guī)格
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保存條件
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提取液
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液體 60 mL×1 瓶
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4℃保存
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試劑一
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粉劑×1 瓶
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-20℃保存
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試劑二
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粉劑×1 支
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-20℃保存
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試劑三
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粉劑×2 支
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-20℃保存
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試劑四
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粉劑×2 支
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-20℃保存
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試劑五
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液體 15 mL×1 瓶
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4℃保存
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產(chǎn)品說(shuō)明：
肌酸激酶(Creatine Kinase，CK)(EC 2.7.3.2)也成為肌酸磷酸激酶， 主要存在于心臟、肌肉以及腦等組織中， 能可逆地催化肌酸與ATP之間的轉(zhuǎn)磷酰基反應(yīng)，是一個(gè)與細(xì)胞能量運(yùn)轉(zhuǎn)、肌肉收縮、ATP再生有直接關(guān)系的重要 激酶。
CK催化磷酸肌酸和ADP生成肌酸和ATP，己糖激酶催化ATP與葡萄糖形成6-磷酸葡萄糖，6-磷酸葡萄糖脫氫酶催化6-磷酸葡萄糖與NADP+生成NADPH，導(dǎo)致340nm光吸收值增加，以此來(lái)表示CK酶活。
注意：實(shí)驗(yàn)之前建議選擇2-3個(gè)預(yù)期差異大的樣本做預(yù)實(shí)驗(yàn)。如果樣本吸光值不在測(cè)量范圍內(nèi)建議稀釋或者增加樣本量進(jìn)行檢測(cè)。
需自備的儀器和用品：
天平、低溫離心機(jī)、恒溫水浴鍋、紫外分光光度計(jì)、1mL石英比色皿、恒溫水浴鍋、研缽/勻漿器、蒸餾水。
注意事項(xiàng)：
1. 血清的CK不穩(wěn)定，采集樣本后盡快測(cè)定，4℃避光保存可穩(wěn)定24h。
2. 樣本蛋白質(zhì)含量需要另外測(cè)定。
3. OD值大于0.6可用提取液適當(dāng)稀釋樣本，并在計(jì)算公式中相應(yīng)的改變稀釋倍數(shù)。
4. ΔA 空白管一般不超過(guò)0.01。
實(shí)驗(yàn)實(shí)例：
1、取0.1g小鼠腦加入1mL提取液進(jìn)行勻漿研磨，取上清后再用提取液稀釋4倍，之后按照測(cè)定步驟操作，用1mL石英比色皿測(cè)得計(jì)算ΔA測(cè)定管=A2測(cè)定-A1測(cè)定=0.638-0.149=0.489 ，ΔA空白管=A2空白-A1空白=0 ，ΔA=ΔA
測(cè)定管-ΔA空白管=0.489-0=0.489，按組織樣本質(zhì)量計(jì)算酶活得：
CK活性(U/g質(zhì)量) =268×ΔA÷W×4(稀釋倍數(shù)) =268×0.489÷0.1×4(稀釋倍數(shù)) =5242.08 U/g 質(zhì)量。
2、取鴨血清200μL，按照測(cè)定步驟操作，測(cè)得計(jì)算ΔA測(cè)定管=A2測(cè)定-A1測(cè)定=0.445-0.423=0.022，ΔA空白管=A2
空白-A1空白=0 ，ΔA=ΔA測(cè)定管-ΔA空白管=0.022-0=0.022，按血清體積計(jì)算酶活得：
CK活性(U/mL)=268×ΔA=268×0.022=5.896 U/mL。
