英文名稱 ： Lacate Dehydrogenase(LDH) Activity Assay Kit
產(chǎn)品包裝 ： 盒裝
產(chǎn)品規(guī)格 ： 50T/24S
儲存條件 ： -20℃
檢測方法 ： 可見分光光度法
有 效 期 ： 6個月
產(chǎn)品組成：
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試劑名稱
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規(guī)格
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保存條件
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提取液
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液體30mL×1瓶
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2-8℃保存
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試劑一
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液體25 mL×1瓶
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2-8℃保存
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試劑二
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粉劑×1 支
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-20℃保存
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試劑三
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液體25mL×1瓶
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2-8℃保存
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試劑四
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液體 60 mL×1瓶
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2-8℃保存
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標(biāo)準(zhǔn)品
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液體1 mL×1支
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2-8℃保存
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產(chǎn)品說明：
L-LDH(EC 1.1.1.27)廣泛存在于動物、植物、微生物和培養(yǎng)細(xì)胞中,是糖酵解途徑的末端酶， 催化丙酮酸與L-乳酸之間的可逆反應(yīng)，伴隨著NAD+/NADH之間互變。
L-LDH催化NAD+氧化L-乳酸生成丙酮酸, 丙酮酸進(jìn)一步與2,4-二硝基苯肼作用生成丙酮酸二硝基苯腙,在堿性溶液中顯棕紅色,顏色深淺與丙酮酸濃度成正比。
注意：實(shí)驗(yàn)之前建議選擇2-3個預(yù)期差異大的樣本做預(yù)實(shí)驗(yàn)。如果樣本吸光值不在測量范圍內(nèi)建議稀釋或者 增加樣本量進(jìn)行檢測。
需自備的儀器和用品：
可見分光光度計,恒溫水浴鍋,臺式離心機(jī),可調(diào)式移液器,1mL玻璃比色皿,研缽/勻漿器/細(xì)胞超聲破碎儀,冰和蒸餾水。
注意事項(xiàng)：
ΔA大于1.3或者小于0.01時，建議將樣本用蒸餾水稀釋或者增大樣本量進(jìn)行實(shí)驗(yàn)，注意同步修改計算公式。
實(shí)驗(yàn)實(shí)例：
1. 稱取0.103g景天葉片，加入1mL提取液，進(jìn)行冰浴勻漿，8000g，4℃離心10min，取上清置冰上待測。之后按照測定步驟操作，用1mL玻璃比色皿測得計算ΔA=A測定管-A 對照管=0.206-0.134=0.072，帶入標(biāo)曲y=0.6238x+0.0227 ,R2=0.9983，得x=0.079 μmol/mL，計算乳酸脫氫酶活性得：L-LDH(U/g質(zhì)量)=66.67×x÷W =51.14 U/g
2. 稱取0.109g兔肝，加入1mL提取液，進(jìn)行冰浴勻漿，8000g,4℃離心10min，取上清用蒸餾水稀釋80倍后 置冰上待測。之后按照測定步驟操作，用1mL玻璃比色皿測得計算 ΔA=A測定管-A對照管=0.936-0.095=0.841,帶入標(biāo)曲y=0.6238x+0.0227 ，R2=0.9983，得 x=1.312 μmol/mL，計算乳酸脫氫酶活性得：L-LDH(U/g質(zhì)量)=66.67×x÷W ×稀釋倍數(shù)=64198.93U/g
3. 取50μL馬血清之后按照測定步驟操作,用1mL玻璃比色皿測得計算ΔA=A測定管-A對照管=0.529-0.155=0.374,帶入標(biāo)曲y=0.6238x+0.0227,R2=0.9983,得x=0.563 μmol/mL，計算乳酸脫氫酶活性得：L-LDH(U/mL)=66.67×x =37.535 U/mL
